血液RNA提取的挑战与难点
血液是科研生命研究中最常用的生物样本之一。然而,由于其成分复杂且含有大量RNase,血液RNA的提取成为科研中的一大难题。
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为分析决这一挑战,广州 ■918博天堂 ■生物科技有限公司推出了核酸提取或纯化试剂盒(血液RNA提取试剂)磁珠法,本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐,EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)样本中提取总RNA ,采用特异性结合RNA的纳米磁珠和独特的缓冲液体系。硅羟基纳米磁珠能高效、专一吸附RNA,可最大限度去除杂质蛋白等,提取的RNA纯度高,质量稳定,没有蛋白质和其他杂质污染,可直接用于下游实验。
核酸提取或纯化试剂盒(血液RNA提取试剂)磁珠法
特点和优势
· 不使用任何有毒试剂,安全高效,对酚、氯仿等有毒试剂说拜拜;
· 操作简单,省力气;无需单独裂解红细胞,不用离心,直接加样;
· 单人份提取,灵活可取;
· RNA 纯度高,DNA残留低;
· 与传统裂解红细胞的方案,同样操作24个样的情况下,能节省约4个小时;
· 耗材厂家注塑,成本价格可控,同样的价格,不一样的享受。
实验结果
某三甲医院全血样本1-8,使用271602血液RNA提取试剂盒对样本进行提取,得到的核酸测量浓度、纯度,在跨外显子区域(exon spanning primer&probe)设计引物,对得到的RNA进行反转录和非反转录扩增,计算 △Ct值。

使用某隆Gentier 96E荧光定量PCR扩增,扩增曲线、熔解曲线图如下:

图1 逆转录组样本扩增曲线图

图2 无逆转录组样本熔解曲线图


由结果可知:△CT(不转录组CT-转录组CT)均大于5,说明提取后RNA中残留的基因组DNA较少,所得到的RNA成分纯度高,适用于后续RNA诊断。
配套仪器
MDx-12全自动DNA甲基化一体机
仪器特点:
· 独特的混合方式
采用水平偏心运动加磁套垂直搅拌的组合方式,实现大体积样本处理;
· 甲基化一步到位
采用独有的双排11孔试剂条,实现核酸纯化到DNA甲基化一步到位,同时节省空间;
· 样本处理体积大
最高可处理10ml样本,洗脱体积最小可至20ul,轻松实现核酸高度浓缩;
· 可自由编程
具有程序分组,便于程序管理;程序自定义编辑功能,操作灵活,可满足不同试剂的要求;
· 系统后台强大
用户可自定义系统后台,并可保存多组后台参数,方便匹配不同的实验方案;
· 污染控制
1)内置紫外消毒模块,可定时进行紫外消毒;
2)独特的定向排风结构设计,有效避免气溶胶的污染。
· 工作效率高
2小时即可实现12个样本的核酸提取纯化以及甲基化处理;
· 试剂开放
兼容各种磁珠法核酸提取试剂及DNA甲基化试剂;
· 人性化设置
甲基化DNA自动转移至1.5ml离心管,无需用户自己转移;
· 安全可靠
开门后自动停止紫外消毒、提取运行,保障操作安全。
封闭性实验舱最大程度减少操作者与试剂的接触。智能化操作,避免有害物质对人体的危害;
· 通量灵活
用户根据自己的需求可自由选择1-12样本通量,不浪费耗材。